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人肾癌细胞A498与PG电子的生物医疗研究

发布时间:2025-07-21   信息来源:司宽盛

PG电子培养细胞的条件包括:气相为95%空气和5%二氧化碳,温度保持在37℃,使用的培养基为MEM配合10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素(P/S)。对于贴壁细胞的传代方法,首次传代推荐比例为1:2,每两天更换培养液。

人肾癌细胞A498与PG电子的生物医疗研究

PG电子建议同时购买所需的培养材料,以获取更多优惠。收到细胞后,应使用75%酒精对细胞瓶进行消毒,并在超净工作台上进行无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时,以便细胞适应生长环境,然后进行处理。在显微镜下观察细胞生长情况,并拍照记录(建议每个倍数拍摄40x、100x和200x各一张)。前三天的照片将作为重要的售后依据,若未提供照片,默认为收到的细胞状态良好。

细胞传代的具体步骤如下:对于贴壁细胞,首先去除培养液,并用不含钙、镁的PBS对细胞进行润洗1-2次。接着添加2.5%的胰蛋白酶消化液,放入37℃培养箱中消化1-2分钟,直至细胞大部分变圆并脱落后,加入完全培养基终止反应。轻轻吹打细胞后,将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM下离心5分钟,弃去上清液后补加1-2ml完全培养基重悬。

接着将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代,补充新的完全培养基至每个瓶5-8ml,然后放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中继续培养。

对于悬浮细胞的传代,采用半换液法时,需将培养瓶竖立放置静置约1小时,轻轻吸出约3ml的培养基,再补充3ml的完全培养基。如果培养基颜色变化缓慢,可以直接添加约500ul的FBS。通过这样的方式进行3次传代后,应进行一次离心换液,以去掉死细胞,保持细胞活性。具体操作是在1000RPM下离心5分钟,弃去上清后补加新的完全培养基,重悬细胞后根据实际情况进行传代。

在细胞冻存方面,当细胞长至覆盖瓶80%面积时,应弃去培养液,用PBS清洗一次,然后加入2.5%的胰蛋白酶消化液,待细胞回缩后,迅速加入完全培养基终止消化,再轻轻吹打,使之脱落,转移至离心管进行离心处理。弃去上清后,加入无血清冻存液混匀,然后进行冻存操作。冻存细胞需存放在-80℃的冰箱内,至少24小时后才能转入液氮罐中。

细胞复苏时,需要从液氮中取出冻存管,并迅速放入37℃水浴中解冻。同时,注意对冻存管的外壁进行消毒。细胞解冻后转移至含有完全培养基的离心管中,再进行离心处理并最终接种至培养瓶中,确保细胞能及时适应新的培养环境。

注意事项:在运输过程中,细胞可能会发生脱落,这是正常现象。若发现脱落较多,应进行处理,确保细胞的培养和生长状态保持在最佳水平。依赖PG电子的细胞培养方案,您能够实现更高质量的细胞培养效果。