多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）是通过免疫动物以一种包含多种抗原决定簇的抗原进行制备。该过程能够刺激多种B细胞克隆的产生，从而合成出针对不同抗原表位的抗体。最终获得的免疫血清实际上是多种抗体的混合物，这就是多克隆抗体的特性。相比之下，单克隆抗体则是由单一的B细胞克隆生成，具有高度的一致性，只针对特定抗原的表位，通常通过杂交瘤技术进行制备。这项技术将具有特异性抗体分泌能力的B细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合，形成B细胞杂交瘤。

一、单抗与多抗的优缺点

多克隆抗体的优点包括：

1. 可放大低表达水平的靶蛋白信号；
2. 能识别多个抗原表位；
3. 较单克隆抗体更能容忍抗原中的微小变化；
4. 能够识别与免疫原蛋白质具有高同源性的其他蛋白质；
5. 多克隆抗体常用于检测变性蛋白质；
6. 多表位的识别通常能提供更强的检测信号。

多克隆抗体的缺点：

1. 容易产生批次间的差异；
2. 可能产生非特异性抗体，导致背景信号；
3. 不适合探测特定的抗原结构域。

单克隆抗体的优点：

1. 杂交瘤技术制得后可提供恒定的抗体来源，所有批次一致；
2. 切片和细胞染色产生的背景较低；
3. 具备特异性，适用于特定抗原分析，背景染色显著低；
4. 同质性极高；
5. 特异性使其在混合物中高效结合抗原。

单克隆抗体的缺点：

1. 尽管可生成大量特异性抗体，但可能会特异性过强；
2. 经过化学处理后比多克隆抗体更易丢失表位，但可通过使用多个单克隆抗体进行互补。

二、抗体的选择要点

若对抗体的特异性要求较高且需长时间使用一致的抗体，或需应用于多种检测技术（如WB/IP/IF/ICC等），推荐选择单克隆抗体。相对而言，多克隆抗体的特异性较差，不同批次间存在差异，因此在特异性和一致性方面的应用受限，可能造成免疫检测时的背景增强。尽管存在交叉反应的问题，但由于多克隆抗体能识别多个抗原表位，其结果在抗原构象改变时相对稳定。如果免疫原的获取存在困难，建议制备单克隆抗体。

对于那些对特异性要求不高，或者需要进行沉淀和凝集反应的检测实验，多克隆抗体是一个合适的选择。相较于单克隆抗体，多克隆抗体的制备时间短，初次制备成本低，在某些情况下也是理想选择。此外，在相同条件下，使用多克隆抗体可以提高检测的灵敏度，对于低丰度的蛋白质也更容易检出。

三、抗原的选择

抗原的选择应包括天然蛋白、重组可溶蛋白、重组变性蛋白和多肽。抗原的质量越高，制备高质量抗体的成功概率也越大。目前，抗体制备常使用重组蛋白或多肽作为抗原。

通常情况下，重组蛋白作为抗原更可能包含多个抗原决定簇，不仅具备空间表位，还包括线性序列，能够更有效地刺激免疫反应，从而获得应用更广泛的抗体，特别是在目标蛋白已知存在修饰或复杂结构时，应优先选择重组蛋白。

在某些情况下，可能需要使用多肽进行抗体制备，例如针对同源蛋白家族中特定成员的抗体开发。这时需要找到特异性的氨基酸以合成多肽，或者在多肽合成时对特定氨基酸进行改造以获得抗体。

选择抗原多肽时一般遵循以下原则：

1. 选择位于蛋白表面的序列；
2. 确保序列不形成α-螺旋结构；
3. N端和C端的肽段比中间部分更优；
4. 避免蛋白内部重复或相似的序列；
5. 避免同源性过强的肽段；
6. 可以在N端和C端进行交联，但需选择对抗体产生影响较小的一端；
7. 避免序列中Pro的数量过多，保持一两个Pro可帮助肽链结构稳定，提高特异性抗体的生成。

总之，结合在PG电子的多克隆和单克隆抗体制备优势，研究人员可以选择适合的抗体形式以满足不同实验需求，确保结果的准确性和重复性。