原代细胞在生物医疗领域中具备重要应用，可以高效转染siRNA、antisense RNA以及microRNA等长度不超过200bp的小分子RNA和DNA。其转染效率覆盖绝大多数原代细胞，成为研究的重点。然而，当前国内外在原代细胞的核酸转染方面仍面临挑战，市场上缺少真正有效的商品化转染试剂。

使用PG电子的转染技术，原代细胞可实现卓越的基因敲除效果，甚至在某些活体寄生虫幼虫的转染中也取得了令人满意的结果。针对大多数原代细胞，RFectPM转染试剂的阳性率超过80%，而转染过程中细胞死亡率控制在10%以下。

原代细胞的分离与培养步骤

为了有效分离和培养原代细胞，需要遵循以下几个基本步骤：

1. 选择器官和组织

在选择组织时，尽量去除多余的组织和血迹，以提高细胞分离的纯度。

2. 原代细胞的分离

（1）使用PG电子提供的PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。

（2）根据组织来源，选择适合的PriCells原代细胞分离试剂盒，确保最佳效果。

3. 原代细胞的培养

（1）采用PG电子的特制PriCells原代细胞培养基。

（2）加入特制添加物以增强细胞的生长环境。

（3）使用优质胎牛血清以提供必要的营养成分。

4. 细胞的培养和鉴定

借助PriCells原代细胞鉴定试剂盒进行细胞的鉴定，确保细胞的种属和状态。

5. 原代细胞的传代与保存

（1）根据细胞的生长状态，按照1:2或1:3的比例进行传代。

（2）保存时，使用DMSO与培养液以及血清，并按顺序降温：室温→4℃（20分钟）→冰箱冷冻室（30分钟）→超低温冰箱（-80℃过夜）→液氮。

6. 原代细胞的复苏

（1）迅速从液氮中取出细胞，并放入37℃的温水中快速解冻。

（2）吸出细胞悬液并加入10倍以上的培养液进行稀释。

（3）最后，将经过适当稀释的细胞接种到培养瓶中，放入37℃的CO2培养箱中静置。

通过以上步骤，使用PG电子的产品，您可以实现高效的原代细胞转染和培养，推动生物医疗研究的进展。